Васко Нуньєс де Бальбоа (1475—1519).
Цей маршрут становив 50-65 км і швидко залишився через труднощі транспортування. Вже 1515 року капітан Антоніо Тельо-де-Гусман відкрив новий шлях через перешийок, який починався від Панамського затоки на Тихоокеанському узбережжі і вів до покинутого міста Номбре-де-Діос на березі Карибського моря.
Панамський перешийок утворився у пліоцені, близько трьох мільйонів років тому. Після його утворення відбулося взаємопроникнення фауни та флори обох материків, що суттєво змінило колишнє положення.
Відповідно до договору Панама передавала у відання США "на вічні часи" канал і території вздовж його траси завширшки 10 миль. В обмін на це США заплатили державі Панамі 10 мільйонів доларів та зобов'язалися виплачувати орендну плату за користування отриманою ними територією в 250 тисяч доларів щорічно.